Система эпизоотологического контроля при лёгочных стронгилятозах сельскохозяйственных животных и ее совершенствование

Изучение роли и места альбена в системе противопаразитарных мероприятий

На основе действующего вещества альбендазола относящегося к эффективным и малотоксичным антигельминтикам группы бензимидазолов в «Научно-внедренческом центре Агроветзащита» разработан препарат альбен. Препарат выпускается в виде 20 % гранулята и в виде таблеток. Один грамм гранул содержит 200 мг албендазола. В одной таблетке весом 1,8 г содержится 360 мг албендазола.

Альбен - антигельминтик широкого спектра действа, активен в отношении половозрелых и неполовозрелых нематод и цестод, а также половозрелых трематод. Обладая овоцидным действием, снижает зараженность гельминтами пастбищ. Механизм действия препарата заключается в нарушении углеводного обмена и микротубулярной функции гельминтов, что приводит к их гибели и выделению из организма животного.

Изучение острой и субхронической токсичности, кумулятивных и аллергизирующих свойств препарата альбен

Изучение параметров острой токсичности альбена проводили на 30 интактных белых мышах массой 18 - 20 г, которых разделили на 5 групп.

Животных перед опытом выдерживали на голодной диете в течение 18 - 20 часов. Суспензию альбена приготовленную на полиэтиленгликоле в соотношении 1:1 вводили с помощью иглы с булавовидным утолщением в желудок белым мышам в дозе не более 1,0 мл. Если же при расчетах оказывалось, что необходимо ввести препарат в больших объемах, то суспензию препарата вводили по 0,5 - 0,8 мл с интервалом 0,5 - 1,0 час.

Препарат вводили животным натощак в дозах: первой группы - 0,2 мл; второй - 0,5 мл; третьей - 0,8 мл; четвертой - по 0,7 мл, через час повторно вводили препарат в той же дозе; пятой - по 0,9 мл и через час повторно вводили по 0,9 мл.

Для приготовления суспензии брали 21,0 г 20 % - ного гранулята альбена, тщательно растирали в ступке пестиком и по частям доводили смесью воды и полиэтиленгликоля до массы 100,0 г. Полученная суспензия была однородной, в 1 мл содержалось 210 мг 20 % - го гранулята альбена (табл.2.15.).

После перорального введения различных доз альбена гибель животных наступала преимущественно на вторые сутки и продолжалась в течение последующих суток, к концу пятых суток гибель животных приостановилась, однако клиническое наблюдение за подопытными животными продолжалось в течение двух недель. Оставшиеся в живых белые мыши находились в удовлетворительном состоянии, поедае- мость корма была хорошей, других расстройств общего состояния животных не отмечалось (табл.2.16.).

Обработка материала по изучению токсичности препарата альбен на белых мышах

Таблица 2.16.

Дозы, мг/кг

2114

5319

8545

13903

17695

Выжило

6

5

3

2

0

Погибло

0

1

3

4

6

Z

0,5

2,0

3,5

5,0

d

3205

3226

5358

3792

Zd

1602,5

6452

18753,0

18960,0

п = 6 I Zd = 1602,5 + 6452 + 18753,0 + 18960 = 45767,5 мг/кг Подставляя в формулу полученные данные по обработке материала токсичности альбена (табл. 2.16.), вычислили среднесмертельную дозу: 45767,5

Определение ЛД50 альбена на белых мышах (1 мл суспензии этого препарата содержит 210 мг альбендазола)

Таблица 2.15.

Группы животных

I

II

III

IV

V

№ животных

Масса,

г

Кол-во,

мл/кг

Масса,

г

Кол-во,

мл/кг

Масса,

г

Кол-во, мл/к г

Масса,

г

Кол-во,

мл/кг

Масса,

г

Кол-во,

мл/кг

0,2

0,5

0,8

1,4

1,8

1

19,5

2154,0

20,5

5122,0

20,2

8317,0

21,1

13934,0

21,0

18100,0

2

19,8

2121,0

19,5

5385,0

19,0

8842,0

21,1

13934,0

21,0

18000,0

3

20,0

2100,0

19,5

5385,0

18,3

9180,0

21,0

14000,0

21,5

17581,0

4

20,2

2079,0

19,3

5440,0

19,4

8660,0

21,6

13611,0

21,4

17664,0

5

20,0

2100,0

19,7

5330,0

20,8

8077,0

21,3

13803,0

21,4

17664,0

6

19,7

2132,0

20,0

5250,0

20,5

8195,0

20,8

14135,0

21,9

17260,0

Доза средняя, мг/кг по ДВ

2114,0

5319,0

8545,0

13903,0

17695,0

Погибло животных в группе

0

1

3

4

6

Таким образом, среднесмертельная доза альбена для белых мышей при алиментарном введении составляет 10067,1 мг/кг, что дает основании отнести этот препарат к 4-му классу опасности (ГОСТ 12.01.007-76).

Определение кумуляции

Кумулятивные свойства альбена определяли на 20 белых крысах по методу Ю.С. Кагана и В.В. Станкевича. Препарат вводили перорально в дозах от 1/2 ЛД50 (10067,1 мг/кг) до 50 % - ной гибели животных с вычислением коэффициента кумуляции (Ккум). (Ккум) - отношение суммарной дозы вещества, вызывающего гибель 50% животных к дозе, вызывающей 50 % - ную гибель животных при однократном введении.

Полученные результаты представлены в таблице 3 и свидетельствуют о том, что после введения альбена в дозе 1/5 от ЛД50 , т.е. 2033,5 мг/кг в течение 5 дней гибели крыс не наблюдали. При последующем введении препарата в течение 7 дней в дозе 1/3 от ЛД50 (3322,3 мг/кг) пала одна крыса. Остальным выжившим крысам вводили альбен в дозе 1/2 от ЛД50, т.е. 5038,5 мг/кг, после чего пало 9 голов. Суммарная доза альбена, вызвавшая 50 % гибель крыс составила 70677,8 мг/кг. Следовательно, коэффициент кумуляции составил 7.

Таким образом, по общепринятой классификации по степени выраженности кумулятивных свойств (Я.И. Лебедь, 1964) альбен относится к IV классу веществ - со слабо выраженной кумуляцией.

Изучение влияния препарата альбен на организм животных: на антитоксическую функцию печени

В опыт по изучению влияния альбена на антитоксическую функцию печени взяли - 70 белых беспородных мышей, массой 18 - 20 грамм и разделили их на 3 группы. Контрольных и подопытных животных подбирали парами по весу и гексенал им вводили одновременно. Альбен в дозе 5,0 мг/кг и 10,0 мг/кг массы тела давали перорально индивидуально с помощью зонда в виде взвеси в 2 % - ном крахмальном клейстере. Раствор гексенала готовили в асептических условиях на стерильной воде для инъекций непосредственно перед применением и вводили внутрибрюшинно в дозе 80 мг/кг массы тела (1 мл/100 г массы) через 1, 3 и 24 часа после дачи препарата.

Скорость наступления и длительности гексеналового сна отсчитывали с момента принятия «бокового положения» до первых попыток изменить его и выражали в минутах.

Результаты исследований функционального состояния печени представлены в табл. 2.17.

Таблица 2.17.

Г руина

Количество живот, в гр.

Доза препарата мг/кг но ДВ

Время сна мышей, мин.

Опытная

1 час

10

22,3±0,1

3 часа

10

5,0

21,7±0,30

24 часа

10

24,5±0,20

Опытная

1 час

10

29,8±0,5

3 часа

10

10,0

24,6±0,4

24 часа

10

25,4 ±,81

Контроль

10

21,7

Как показали исследования, препарат в испытуемых дозах достоверно увеличения времени сна у мышей не вызывал. Следовательно, альбен не обладает гепатотропным действием и не приводит к нарушению функционального состояния печени.

На основании полученных результатов разработали схему- модель влияния препарата альбен на антитоксическую функцию печени животных (рис.2.136.).

Определение субхронической токсичности

Опыты проводили на 50 белых беспородных крысах - самцах с исходной массой ПО - 120 г. Им в желудок ежедневно в течение 2-х месяцев через желудочный зон вводили альбен в виде суспензии на крахмальном клейстере в дозах 1/10, 1/20, 1/100 и 1/1000 от ЛД50, что соответствовало 100,67; 50,33; 10,0; 0,1 мг/кг. Каждая подопытная и контрольная группы состояли из 10 животных. Животным контрольной группы, при тех же условиях содержания и кормления, вводили равный объем воды.

Признаков токсикоза и гибели животных, не наблюдали, что дает основание говорить об отсутствии у препарата в указанных дозах эффекта кумуляции по токсическому признаку.

Обследование животных, получавших в течение 10 недель альбен дозе 1/100 и 1/1000 от ЛД с использованием клинико-биохимических методов не показало статистически значимых отличий опытных и контрольных групп. Анализы проводили на 60-й день опыта после де- капитации животных. Альбен не влиял на прирост массы тела животных (табл. 2.18.).

Влияние альбена на прирост массы тела крыс при введении в желудок в течение 2-х месяцев

Таблица 2.18.

Сроки взвеши- ваиин

Масса гела крыс, г

контроль

1/100 ог ЛД50

1/1000 от ЛД50

0

110±1,2

110±2,0

120±1,8

2 недели

135,2±2,4

130,1±1,5

140,2±2,8

4 недели

150,4±1,2

149,2±2,4

152,1± 1,0

6 недель

190,3±1,4

190,3±2,0

202,5± 1,4

8 недель

241,1±2,8

240,4±2,2

240,8± 1,0

10 недель

290,1±1,2

294,2±2,8

290,2±0,8

Кровь для исследований брали из хвостовой вены, количество эритроцитов и лейкоцитов определяли в камере Горяева, уровень гемоглобина - фотометрическим методом.

Гематологические показатели крыс, получавших альбен, незначительно отличались от таковых у животных контрольной группы (табл. 2.19.).

Таблица 2.19.

Гематологические показатели крыс на фоне введения альбена (субхроническая токсичность)

Г руины животных

Количество

животных

Гемогло

бин,

ммоль/л

Эритроциты,

1012

Лейкоциты, 109

Контрольная

10

16,0±0,1

7,8±0,2

13,9±0,2

Подопытная 1/100 от ЛД50

10

16,2±0,2

7,6±0,1

14,7±0,2

Подопытная 1/1000 от ЛД5()

10

15,8±0,3

7,2±0,1

14,9±0,2

На основании полученных результатов разработали схему- модель изменения гематологических показателей гомеостаза у животных под воздействием альбена (рис.2.137.).

Биохимические показатели животных изучали на тех же животных (табл. 2.20.).

Таблица 2.20.

Биохимические показатели крови крыс на фоне введения альбена

Группы

животных

Число

жив-х

АлАТ,

ммоль/час

АсАТ,

ммоль/час

Молочная кислота, мг %

пвк,

мг %

Контрольная

10

0,76±0,01

0,80±0,01

22,8±0,9

2,4±0,1

Подопытная 1/100 от ЛД50

10

0,79±0,01

0,81±0,01

22,8±0,8

2,3±0,1

Подопытная 1/1000 от ЛД5(,

10

0,78±0,02

0,83±0,01

23,2±0,2

2,4±0,1

Как видно из представленных в таблице материалов существенных изменений в биохимических показателях крови у подопытных крыс не установлено.

Функциональное состояние почек оценивали по показателям суточного диуреза, содержанию белка и мочевины. Мочу собирали в течение 24 часов.

 
Посмотреть оригинал
< Пред   СОДЕРЖАНИЕ   ОРИГИНАЛ   След >