Микробиология

УДК 616.33

Взаимосвязь показателей кислотности желудочного сока от обсеменённости желудочно-кишечного тракта Helicobacter Pylori

Татаренко Д.П.

(Научный руководитель - д.мед.н., проф., Витрищак С.В.)

Ключевые слова: Helicobacter pylori, уреаза, кислотность, каталаза, обсеменённость.

Аннотация: Статья посвящена взаимосвязи обсеменённости желудочно-кишечного тракта Helicobacter pylori с повышенной кислотностью желудка. Состоит из обзорной и исследовательской части. Произведён обзор литературы на предмет понятия о хелико- бактериозе и её возбудителе, свойствах уреазы и других ферментов, которые выделяет эта бактерия, повышенной кислотности желудка и методах её измерения и взаимосвязи гиперацидных состояний с микроорганизмом Helicobacter pylori.

Введение. Helicobacter pylori является основным патогенным микроорганизмом желудка, вызывающим гастрит, язвенную болезнь, аденокарциному желудка и низкодифференцированную лимфому желудка.

Helicobacter pylori-инфекция является одной из наиболее широко распространенных инфекций на земном шаре. По оценкам различных авторов, во всем мире инфицированность этим микроорганизмом достигает 60%.

Одним из самых актуальных вопросов, является диагностика хе- ликобактериоза. В настоящее время для выявления Helicobacter pylori используется большое количество инвазивных и неинвазивных методов. Однако с течением времени стало ясно, что ни один из них не является универсальным, т.е. ни один из них не обладает 100% чувствительностью и специфичностью, и у каждого метода есть свои преимущества и недостатки. В соответствии с IV Маастрихтским соглашением (2011), диагностику Helicobacter pylori-инфекции желательно проводить с помощью неинвазивных методов. Наиболее часто для диагностики Helicobacter pylori-инфекции применяются морфологическое исследование и уреазный тест, оба метода являются инвазивными. За счет этого значительно увеличивается количество эндоскопических исследований, а также вероятность реинфицирования хеликобактериозом в случае недостаточной обработки эндоскопического оборудования.

Повышенная кислотность желудка является довольно распространенной проблемой. Она проявляет себя в виде кислотных отрыжек, изжоги, боли в животе различной локализации, но преимущественно в эпигастральной области, так называемых «голодных» болей, несварения желудка, тошноты, рвоты и других гастроэнтерологических симптомов, и синдромов.

Кислотность желудочного сока - показатель содержания в этом веществе соляной кислоты (раствор хлороводорода - НС1), измеряющийся в единицах pH (уровень Гидрогена) (Приложение 1). Хроническое повышение кислотности желудка - симптом различных гастроэнтерологических заболеваний, прежде всего - гастрита, язвы желудка или двенадцатиперстной кишки. Норма данного показателя - 1,5-2 pH до приема пищи. Кислотность, измеряемая на стенках органа, может быть немного выше - до 2 pH, а в глубине эпителия - до 7 pH [8].

Цель работы - изучить взаимосвязь кислотности желудочного сока с обсеменённостью желудочно-кишечного тракта Helicobacter pylori.

Из вышеуказанной цели следуют задачи работы: описать биохимические свойства Helicobacter pylori; дать характеристику ферментов, которые выделяет Helicobacter pylori и их воздействию на состав желудочного сока; согласно вышеуказанным данным выдвинуть гипотезу о воздействии Helicobacter pylori на желудочный сок человека; провести исследование желудочного сока у больных с Helicobacter pylori и тем самым доказать или опровергнуть гипотезу, сделав выводы о воздействии ферментов этой бактерии на кислотность желудочного сока.

Объект исследования - кислотность желудочного сока человека.

Субъект исследования - зависимость кислотности желудочного сока от обсеменённости желудка Helicobacter pylori.

Helicobacter pylori - спиралевидная грамотрицательная бактерия, которая инфицирует различные области желудка и двенадцатиперстной кишки. Многие случаи язв желудка и двенадцатиперстной кишки, гастритов, дуоденитов, и, возможно, некоторые случаи лимфом желудка и рака желудка этиологически связаны с инфицированием Helicobacter pylori. Однако у большинства инфицированных носителей Helicobacter pylori не обнаруживается никаких симптомов заболеваний.

Исследования, посвященные изучению проблем эпидемиологии хеликобактериоза, немногочисленны. Helicobacter pylori, являясь источником инфекционного процесса, соответствует всем постулатам Коха, определяющим свойства микроорганизма-возбудителя заболевания.

Источником, или естественным резервуаром, хеликобактериоза является зараженный человек. Это доказал еще в 1985 г. В.Marshall, у которого развился острый гастрит, после того, как он выпил раствор с культурой Helicobacter pylori, полученной от 65-летнего больного хроническим гастритом и содержащий 106 бактерий. В первые 6-8 дней после заражения («инкубационный период») никаких клинических проявлений заболевания не обнаруживалось, на 7 день появились дис- пептические явления и боли. Эндоскопические признаки гастрита определялись уже на десятый день после заражения. Факт заражения, при приеме культуры Helicobacter pylori были подтверждены при последующих исследованиях как у людей, так и у ряда лабораторных животных (особенно показательны исследования с заражением человекообразных обезьян) [39]. Однако заселение слизистой оболочки желудка Helicobacter pylori не всегда вызывает развернутую картину хронического гастрита. Иногда заболевание носит смазанный (латентный) характер, или принимает характер носительства. Носительство у практически здоровых людей возможно связано с заселением их слизистой оболочки слабовирулентными штаммами, или уменьшением количества рецепторов на поверхности желудка, способствующих адгезии микроорганизма [50].

Бактерия была вначале названа Campylobacter pyloridis в 1985 году, затем название было исправлено в соответствии с правилами латинской грамматики на Campylobacter pylori в 1987 году, и только в 1989 году, после того, как анализ последовательностей ДНК этой бактерии показал, что в действительности она не принадлежит к роду Campylobacter, её и близкие ей виды выделили в отдельный род, Helicobacter Goodwin et al. 1989. Название pylori происходит от «pylorus», которое, в свою очередь, происходит от греческого слова ло/хэро^, означающего буквально «привратник».

Helicobacter pylori продуцируют высокоактивный фермент уреа- зу, каталазу, муциназу, оксидазу, гемолизин, щелочную фосфатазу, гам- ма-глутамилтрансферазу, алкогольдегидрогеназу, глюкосульфосфатазу, протеазу, фосфолипазу, белок - ингибитор секреции соляной кислоты, многочисленные адгезины (к цитоскелету, клеточной мембране, ламинину, холестеролу), цитотоксины белковой природы и др. [2, 7, 48].

Уреаза Helicobacter pylori (мочевинная амидогидролаза, ЕС 3.5.1.5) представляет собой важнейший энзим микроорганизма, определяющий основные звенья патогенеза острых и хронических гастритов типа В. В настоящее время установлено, что свыше 5% всех клеточных белков Helicobacter pylori приходится на долю уреазы, что свидетельствует о «чрезвычайном» уровне продукции данного энзима [29]. Продукция уреазы является маркером многих микроорганизмов (в частности, Proteus mirabilis, Morganella morganii, Providencia rettgeri, Providencia stuartii, Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca, Proteus vulgaris и др.), но Helicobacter pylori превосходит их по интенсивности экспрессии фермента в 2-10 раз [41]. Свойства этого фермента настолько уникальны, что на них следует остановиться отдельно.

Уреаза Helicobacter pylori представляет собой мультимерный энзим с молекулярной массой 380,000±30,000 дальтон [15, 16]. Нативный протеин образован 2-мя структуральными субъединицами Ure А (26,5 Килодальтон) и Ure В (60,3 Килодальтон) и 5-ю добавочными протеинами: Ure I, Ure Е, Ure F, Ure G, Ure H. Эти добавочные протеины содержат ион никеля Ni2+, присутствие которого необходимо для оптимальной количественной активности активного центра апофер- мента [42]. По-видимому, эти полипептиды образуют комплексы с апо- энзимом в процессе формирования каталитической активности фермента. Роль протеина Ure I, присутствие которого существенно не влияет на активность уреазы, не ясна [14]. Важность иона №2+ для Helicobacter pylori столь велика, что в процессе эволюции был сформирован специальный механизм, опосредующий транспорт ионов никеля внутрь бактериальной клетки с помощью специального транспортного мембранного протеина Nix А с молекулярной массой 34 килодальтона [26]. Формирование активного центра обязательно требует 2-х ионов Ni2+. Активный центр энзима локализован в Ure В субъединице, а сам фермент состоит из 6-ти идентичных копий каждой из субъединиц в эквимолярном количестве (как Ure А, так и Ure В) [42]. Фермент обладает абсолютной специфичностью в отношении одного единственного субстрата - мочевины, которую он расщепляет гидролитическим путем до аммиака и угольной кислоты.

Синтез белка Helicobacter pylori требует присутствия постоянного источника азота, без которого жизнедеятельность бактерий попросту невозможна. Уреаза Helicobacter pylori, являющаяся поставщиком большого количества аммиака, обеспечивает микроорганизмы азотом. Эта реакция катализируется другим ферментом микроорганизма глютаминсинтетазой. Благодаря этим процессам NH3 инкорпорируется в аминокислоты, а затем превращается в белок (за счет реакции аммиака с глютаматом с образованием глютамина). Возможно, что эволюционно обусловленная ключевая роль уреазы связана именно с обменно-метаболическими процессами, ассоциированными с азотом мочевины [3].

Наряду с обеспечением выживания Helicobacter pylori и колонизации желудка, продукты жизнедеятельности уреазы обладают прямым воздействием на эпителиальные тканевые структуры хозяина.

Уреаза Helicobacter pylori гидролизует до 85% мочевины, транс- судированной в желудочное содержимое [31]. Сам по себе NH3 способен оказать разрушающий эффект на межклеточные соединения эпителия слизистой оболочки желудка [41].

Накапливаясь в инфицированной слизи в области межклеточных соединений аммиак разрушает физиологический микроклимат пристеночного слизистого барьера, поддерживающего в норме высокий и вариабельный градиент pH между полостью желудка и поверхностью эпителиальных клеток. Аммиак значительно повышает pH внутри слизистой оболочки, приводя тем самым к повышению пропорций неиони- зированного аммиака. Хорошо известно, что только неионизированный аммиак способен проникать через липидные мембраны эпителиальных клеток, причем с повышением pH от 6,6 до 9,0 его проникающая способность увеличивается на 50%. Легко проникнув через мембрану клетки, неионизированный аммиак превращается в NH4+ и ОН, повышая, в свою очередь, интрацеллюлярный и митохондриальный уровень pH и повреждает таким образом митохондриальное и клеточное дыхание и, соответственно, энергетический метаболизм и жизнеспособность клеток. При постановке эксперимента потребление кислорода изолированными клетками и митохондриями ингибируется пропорционально концентрации аммиака. Интересно то, что признаки токсического воздействия аммиака на желудочный эпителий идентичны изменениям, которые ассоциированы с повышением pH среды. Наряду с этим, аммиак истощает альфа-кетоглутарат в цикле трикарбоновых кислот и нарушает синтез ATOP в клетках с аэробным дыханием, приводя к нарушению функции париетальных клеток в кислотопродуцирующем участке слизистой оболочки желудка [36].

Уреаза сама по себе способна выступать в роли активатора клеток моноцитарно-макрофагального ряда, используя механизм, независимый от липополисахаридов Helicobacter pylori. Наряду с этим, уреаза Helicobacter pylori может выступать в качестве хемотаксического фактора для моноцитов и нейтрофилов. В последние годы было установлено, что уреаза играет роль модулятора иммунных воспалительных реакций при пилорическом хеликобактериозе. Так, уреаза Helicobacter pylori индуцирует экспрессию на поверхности моноцитов рецептора интерлейкина2 и экспрессию интерлейкина8 и фактора некроза опухолей.

Данные, полученные некоторыми учёными, подтвердили связь между уреазной активностью Helicobacter pylori и воспалительными изменениями в слизистой оболочке желудка у детей, инфицированных хеликобактериями. Согласно результатам наших исследований, концентрации метаболитов уреазного гидролиза (в частности NH3) коррелируют с тяжестью желудочного воспаления.

В то же время уреаза Helicobacter pylori оказывает прямой токсический эффект на полиморфно-ядерные нейтрофилы, снижая их функциональную активность и способствуя размножению Helicobacter pylori. Этот эффект опосредуется аммиаком, ингибирующим дегрануляцию нейтрофилов, уменьшающим величину актина цитоскелета, увеличивающим деполимеризацию актина и блокирующим слияние фагосом и лизосом.

Подводя итог всему вышесказанному, очевидно, что уреаза Helicobacter pylori является фактором, обеспечивающим колонизацию желудка и выживание бактерий в организме хозяина. Наряду с этим, продукты метаболизма гидролитических реакций, ассоциированных с уреазой, вызывают тяжелые повреждения слизистой оболочки желудка у пациентов с хеликобактериозом. Длительная персистенция возбудителя вызывает, наряду с воспалением, формирование преканцерозных изменений [28].

Каталаза - это фермент, являющийся катализатором в реакции разложения перекиси водорода, при которой образуются вода и молекулярный кислород: Н202 + Н202 = 02 + 2Н20. Биологическое значение Каталазы заключается именно в разложении перекиси водорода, которая образуется в клетках при воздействии ряда флавопротеиновых оксидаз, чем обеспечивается действенная защита клеточных структур от разрушения, которое осуществляет перекись водорода. Если вследствие генетических причин возникает дефицит Каталазы развивается акаталазия. Это наследственная болезнь, клиническими проявлениями которой являются изъязвления слизистой носа и полости рта, а в некоторых случаях явно выраженные выпадение зубов и атрофические изменения альвеолярных перегородок.

Нами проведено исследование воздействия фермент каталазы на кислотность желудочного сока подопытных лабораторных крыс [21].

Гипотеза эксперимента - избыточное содержание фермента каталазы повышает кислотность желудочного сока.

Материалом исследования явились 160 белых лабораторных крыс половозрелого возраста массой от 160 до 225 г, которые выращивались в виварии ГЗ «Луганский государственный медицинский университет» в общепринятых благоприятных для них условиях. Экспериментальные работы проводились соблюдая нормы биоэтики и гуманности обращения с лабораторными животными [22]. Все подопытные животные были разделены на подопытную и контрольную группу. Подопытная группа состояла из 130 крыс (68 самцов и 62 самки), которые подвергались воздействию экспериментального ферментативного препарата Каталазы. В контрольной группе было 30 крыс (20 самцов и 10 самок), которым вместо каталазы вводился обычный физиологический раствор хлорида натрия. В качестве экспериментального препарата использовался ферментативный препарат Каталаза (10000 ед/мг протеина, производитель «Sigma», CAS: 9001-05-2, номер по каталогу: С40).

Внутрижелудочная pH-метрия проводилась введением в полость желудка стеклянным электродом (ЭЛ 40) с помощью рН-метра («pH 340») под внутрибрюшинным наркозом тиопенталом натрия в дозе 30 мг/кг массы животного.

Для pH-метрии проводилась верхнесрединная лапаротомия по общепринятой методике, и делался доступ к желудку [23]. Далее проводилась гастротомия в области дна желудка [18]. Вначале проводилось определение базального уровня кислотности желудка, затем в желудок вводился ферментативный препарат Каталаза (10 мг/кг массы тела) с последующим измерением pH через 5, 15 и 30 мин.

У крыс контрольной серии базальная кислотность (pH) в среднем составила 2,54±0,03, что колебалось в пределах 2,20-2,80. Через 5 мин после стимуляции гистамином, величина pH составила 2,16±0,03 в интервале 2,00-2,40; через 15 мин уровень pH повысился до 1,95±0,03 в пределах 1,80-2,15. Через 30 мин. pH в среднем составила 2,01±0,03 с колебаниями в пределах 1,85-2,25. Следовательно, кислотность после введения каталазы стала максимальной через 15 мин.

Динамика изменения pH свидетельствует о том, что крысы относятся к животным с достаточно высокой устойчивостью к гистамину даже при такой высокой концентрации вводимого экзогенной каталазы в дозе 10 мг/кг. По нашим предположениям, в опытах у здоровых крыс в ответ на введение каталазы отмечается высвобождение почти всех запасов секретируемых протеаз. Тот факт, что уже к 30-й мин стимулирование кислотообразования значительно снижается, вероятно, связан с высокой каталазной активностью крыс.

Проведено гистологическое исследования стенки желудка после воздействия каталазой путём взятия биоптат и окраски его красителем гематоксилином и эозином. При гистологическом исследовании слизистая желудка представляла собой цилиндрически-кубический эпителий с умеренным слизеобразованием, собственную пластинку слизистой с умеренными полнокровными сосудами. Встречаются небольшие скопления лимфоциов и эозинофилов. У интактных крыс данные гистологического исследования биоптата стенки желудка показали цилиндри- чески-кубический эпителий с умеренным слизеобразованием, собственную пластинку слизистой с умеренными полнокровными сосудами без скоплений лимфоцитов и эозинофилов.

Таким образом, избыточное содержание каталазы в желудочном соке повышает его кислотность, что и следовало доказать.

Муциназа - представитель группы ферментов различного происхождения, способных расщеплять кислые мукополисахариды.

Кроме того, с помощью фермента муциназа, который продуцируется бактерией, в желудочной слизи разрушается белок муцин, и как следствие она разжижается. Это позволяет хеликобактерным бактериям легко проникнуть в слой защитной слизи и прикрепиться в антральном отделе желудка к клеткам цилиндрического эпителиального слоя, при этом заселив всю слизистую оболочку. Далее может возникнуть воспалительный процесс, и, как следствие, усиливается продуцирование соляной кислоты. При этом бактерия хеликобактер пилори может выделять цитотоксины, которые в свою очередь вызывают повреждение клеток слизистой оболочки, и это способствует развитию язвенной болезни желудка [45].

Гамма-глутамилтрансфераза (ГГТ; синоним - гамма-глютами- лтранспептидаза, ГГТП) - фермент, участвующий в обмене аминокислот. Катализирует перенос гамма-глутамилового остатка с гамма- глутамилового пептида на аминокислоту или другой пептид. Накапливается в основном в почках (уровень ГГТ в 7000 раз выше, чем в сыворотке крови), печени (в 200-500 раз выше) и поджелудочной железе. В клетках локализуется в мембране, лизосомах и цитоплазме [13].

Оксидаза - фермент, катализирующий биологическое окисление.

Биологическое окисление - это совокупность окислительновосстановительных превращений различных веществ в живых организмах. Окислительно-восстановительными называют реакции, протекающие с изменением степени окисления атомов вследствие перераспределения электронов между ними.

Непосредственное использование химической энергии, содержащейся в молекулах пищевых веществ невозможно, потому что при разрыве внутримолекулярных связей выделяется огромное количество энергии, которое может привести к повреждению клетки. Чтобы пищевые вещества, поступившие в организм, должны пройти ряд специфических превращении, в ходе которых происходит многостадийный распад сложных органических молекул на более простые. Это даёт возможность постепенного высвобождения энергии и запасания её в виде АТФ [25].

Щелочная фосфатаза широко распространена в тканях человека, особенно в слизистой оболочке кишечника, остеобластах, стенках желчных протоков печени, плаценте и лактирующей молочной железе. Она катализирует отщепление фосфорной кислоты от ее органических соединений; название получила в связи с тем, что оптимум pH щелочной фосфатазы лежит в щелочной среде (pH 8,6-10,1). Фермент расположен на клеточной мембране и принимает участие в транспорте фосфора [25].

У бактерий Helicobacter pylori щелочная фосфатаза располагается в периплазматическом пространстве, снаружи от плазматической мембраны. Щелочная фосфатаза бактерий относительно устойчива к инактивации, денатурации и деградации. Возможно, одной из функций фосфатазы является отщепление фосфатов от органических молекул, так как многие фосфорилированные соединения не могут проникать через плазматическую мембрану.

Нормой считается активность щелочной фосфатазы в пределах от 10 до 45 ед/мл Увеличение активности щелочной фосфатазы в дуоденальном соке от 46 до 100 ед/мл рассматривается как слабое, от 101 до 337 ед/мл - как значительное, свыше 337 ед/мл - как резкое. Активность щелочной фосфатазы может зависеть от характера питания, что снижает диагностическое значение определения щелочной фосфатазы в кишечном соке.

Клиницисты отмечают, что наиболее часто щелочная фосфатаза является повышенной при гастритах с повышенной кислотностью.

Helicobacter pylori продуцирует цитотоксины, которые разрушают клетки, на стенках желудка образуются эрозийные и язвенные поражения. В редких случаях хеликобактер не образует цитотоксины, тогда язва не развивается, а возникает хеликобактерный гастрит.

На основании обзора современных литературных данных биологической и биохимической характеристики бактерии Helicobacter pylori и воздействия биохимических показателей данного микроорганизма на состав и кислотность желудочного сока можно сделать следующие выводы:

• 1. Наличие жгутиков у Helicobacter pylori, а также гладкой клеточной оболочки и спиралевидной формы, позволяет этому микроорганизму передвигаться в толще слизи вдоль градиента pH и служит одним из факторов его вирулентности;
• 2. Наиболее благоприятными условиями для жизни, роста и размножения микроорганизма Helicobacter pylori считаются: температура +37оС и pH среды 4,0-6,0, хотя они выживают и при pH 2,5. А это означает, что среда желудочного сока полностью подходит для нормальной жизнедеятельности данной бактерии;
• 3. Helicobacter pylori продуцирует высокоактивный фермент уреазу, каталазу, муциназу, оксидазу гемолизин, щелочную фосфатазу, гамма-глутамилтрансферазу, алкогольдегидрогеназу, глюкосульфосфа- тазу, протеазу, фосфолипазу, цитотоксины белковой природы;
• 4. Фермент уреаза Helicobacter pylori обладает абсолютной специфичностью в отношении одного единственного субстрата - мочевины, которую он расщепляет гидролитическим путем до аммиака и угольной кислоты;
• 5. Helicobacter pylori, подобно большинству микроорганизмов, не обладает толерантностью в отношении низких величин pH, в то время как pH среды в желудке за счет присутствия больших количеств НС1, как правило, меньше. Для того, чтобы выжить и колонизировать слизистую оболочку желудка, микроорганизмы вынуждены преодолевать защитный барьер желудочного сока с помощью специального эволюционного механизма, ассоциированного с деятельностью микробной уреазы;
• 6. Повышенное содержание фермент каталазы повышает кислотность желудочного сока, что доказано нашей экспериментальной работой на белых лабораторных крысах;
• 7. С помощью фермента муциназа, который продуцируется бактерией Helicobacter pylori, в желудочной слизи разрушается белок муцин, и как следствие она разжижается, увеличивается содержание соляной кислоты в желудочном соке, а значит, и повышается его кислотность;
• 8. Клиницисты отмечают, что наиболее часто щелочная фосфатаза является повышенной при гастритах с повышенной кислотностью.

Список использованной литературы:

• 1. Акопян И.Г. Методы диагностики хеликобактериоза: учеб, пособие / И.Г. Акопян, Н.В. Барышникова, Т.М. Григорян, Ю.С. Евстратова, А.В. Козлов, И.Ю. Мельникова, В.П. Новикова, Л.П. Хорошинина, О.Ю. Хо- чинская; под ред. А.В. Козлова, В.П. Новиковой. - СПб.: «Издательство «Диалект», 2008. - 88 с., ил.
• 2. Аруин Л.И. Helicobacter (Campilobacter) pylori в этиологии и патогенезе гастрита и язвенной болезни // Арх. пат. - 1990. - №10. - С. 3-9.
• 3. Арутюнов С.Д. Особенности состояния тканей пародонта у больных язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки, ассоциированной

Helicobacter pylori / С.Д. Арутюнов, И.В. Маев, Н.В. Романенко // Пародон- тология. - 2005. - № 3. - С. 30-33.

• 4. Бельмер С.В. Внутрижелудочная pH-метрия в детской гастроэнтерологии / С.В. Бельмер, Т.В. Гасилина, А.А. Коваленко // Методические аспекты. - М., 2001 - 17 с.
• 5. Веливецкая Т.А. 13С-уреазный дыхательный тест на базе прецизионной изотопной масс-спектрометрии / Т.А. Веливецкая, А.В. Игнатьев // Электронный журнал «Исследовано в России». - 18 с.
• 6. Довгаль С.Г. Методы лабораторной диагностики хеликобактери- оза // Акт. пробл. инф. патол., Ч. 1. Спб. - 1993. - С. 21.
• 7. Жебрун А.Б. Антигенность и связывание сывороточных белков клетками и экстрактами клеток X. пилори // Акт. пробл. инф. патол., Ч. 1. Спб. - 1993. - С. 25.
• 8. Ивашкин В.Т. Инфекция Helicobacter pylori: современное состояние проблемы / В.Т. Ивашкин, Т.Л. Лапина // Русский медицинский журнал. - 1999. - Том 4. -№3. - С. 149-151.
• 9. Исаков В.А. Хеликобактериоз // В.А. Исаков, И.В. Домарад- ский. - Медпрактика-М. - 2003. - 411 с.
• 10. Кочетов А.Г. Методы статистической обработки медицинских данных: Методические рекомендации для ординаторов и аспирантов медицинских учебных заведений, научных работников / сост.: А.Г. Кочетов, О.В. Лянг., В.И. Масенко, И.В. Жиров, С.И. Наконечников, С.И. Терещенко - М.: РКНПК, 2012. - 42 с.
• 11. Робакидзе И.С. Развитие гастродуоденальной патологии у

больных, инфицированных helicobacter pylori, в стоматологическом аспекте / И.С. Робакидзе, А.В. Цимбалистов, М.А. Дубова // Вестник

С.-Петербургского университета. - Сер. 11. - 2006. - Вып. 1. - С. 110-116.

• 12. Рапопорт С.И. Гастриты. Пособие для врачей. - М.: «МЕД- ПРАКТИКА-М», 2010. - 20 с.
• 13. Рожавин М.А. Патогенные свойства Campylobacter pylori // Клин. мед. - 1989. - № 11. - С. 20-24.
• 14. Рыбаков А.И. Стоматиты: Автореф. дис. д-ра. мед. наук. - Москва, 1964. - 34 с.
• 15. Рябоконь Е.Н. Определение инфицированности полости рта helicobacter pylori и состояния тканей пародонта у больных язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки / Е.Н. Рябоконь, В.В. Олей- ничук, В.В. Гаргин // Дентальные технологии. - 2008. - №1. - С. 22-24.
• 16. Рябоконь Е.Н. Состояние тканей пародонта при контаминации helicobacter pylori у больных язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки (сообщение 2). / Е.Н. Рябоконь, В.В. Олейничук, В.В. Гаргин, Р.С. Назарян. // Матер1али науково-практично!' конференцн «Вклад молодих вчених в розвиток медично! науки i практики» (30 жовтня 2008 р.). - Харюв. - 2008. - С. 118-119.
• 17. Сафонова Н.В. Гастрит, язвенная болезнь и хеликобактериоз // Н.В. Сафонова, А.Б. Жебрун. - С.-Петербург. - 1995. - 39 с.
• 18. Слпрнов С.М. СпоДб моделювання шгаляцшного впливу ешхлорпдрину на функцюналын показники шлункового соку бших лабо- раторних mypiB / С.М. См1рнов, М.Л. Кувеньова, Д.П. Татаренко // ПУ № 90305. - 26.05.2014. - Бюл. 10. - 2 с.
• 19. Снигирева Д.Г. Комплексное лабораторно-клиническое исследование органов полости рта и ротовой жидкости у детей, больных целиа- кией: Дне. ...канд. мед. наук. - Пермь, 2000. - 156 с.
• 20. Страйер Л. Биохимия. Перевод с англ., под ред. Северина С.Е. Т. 1.-М., Мир, 1984.-232 с.
• 21. Татаренко Д.П. Актуальность проведения экспериментов и изучения органов пищеварения у крыс // Научният потенциал на света - 2013. - София. - Том 15. - 2013. - С. 32-33.
• 22. Татаренко Д.П. Биоэтические аспекты использования лабораторных животных в экспериментальной биологии и медицине // Wschodnie partnerstwo - 2013. - Przemysl, Nauka i studia. - Vol. 21. - 2013. - P. 38—41.
• 23. Татаренко Д.П. Cnoci6 препарування шлунка у mypiB / Д.П. Татаренко, С.М. Слпрнов, М.М. Лопастинський, Г.А. Дубова // РП № 3987 вщ 13.01.2014 р.
• 24. Татарников М.А. Методика социологического опроса в виде анкетирования в здравоохранении / Социология медицины. - № 2 (23). - 2013.
• 25. Уайт. А., Хендлер Ф., Смит Э. Основы биохимии. Т. 1. - М., Мир, 1984.-532 с.
• 26. Успенский Ю.П. Инфекция Helicobacter pylori в клинической практике / Ю.П. Успенский, А.Н. Суворов, Н.В. Барышникова. - СПб.: Ин- формМед, 2011.-587с.
• 27. Фадеенко Г.Д. Helicobacter pylori и внегастральные проявления // Украшський терапевтичний журнал. - 2004. - №2. - С. 95-99.
• 28. Baccaglini L. Urban legends: recurrent aphthous stomatitis /

L. Baccaglini, V. Lalla, J. Bruce et al. // Oral Dis. - 2011. - Vol. 17, № 8. - P. 755-770.

29. Berroteran A. Detection of Helicobacter pylori DNA in the oral cavity and gastroduodenal system of a Venezuelan population / A. Berroteran,

M. Perrone, M. Correnti et. al. //J. Med. Microbiol. - 2002. - Vol. 51.- P. 764-770.

• 30. Bode G. The coccoid forms of Helicobacter pylori - criteria for their viability / G. Bode, F. Mauch, P. Malfertheiner // Epydemiol. Infect. -
• 1993.-V. lll.-P. 483^190.
• 31. Cellini L. Coccoid Helicobacter pylori not culturable in vitro revers in mice / L. Cellini, N. Allocati, D. Angellutti et al. // Microbiol. Immunol. -
• 1994.-V. 38-P. 834—850.
• 32. Cutler A.F., and Prasad. Long term follow-up of Helicobacter pylori serology after succesful eradication // Am.J. Gastroenterol, 1996, V. 31. - P. 85-88.
• 33. Epidemiology of Hp: An Update // «Helicobacter Today»: Highlights From the VII Workshop on Helicobacter pylori, Houston, Texas and the X Works Congress of Gastroenterology, Los Angeles, California. - Houston; Los Angeles, 1994. - P. 4-5.
• 34. Fox J.G. The non - H. pylori helicobacters: their expanding role in gastrointestinal and systemic diseases // Gut. - 2002 (Feb). - 50 (2). - P. 273-283.
• 35. Goodvin C.S. Transfer of Campylobacter pylori and Campylobacter mustelae to Helicobacter gen.nov. as Helicobacter comb, nov., respectively / C.S. Goodvin, J.A. Armstrong, T. Chilvers // Int. J. Syst. Bacteriol. - 1989. - V.39-P. 397.
• 36. Goodwin C. Helicobacter pylori and duodenal ulcer / C. Goodwin, A. Gordon, V. Burke // Med. J. Aust. - 1990. - V.153. - P. 66-67.
• 37. Graham G.J. Campylobacter pylori detected non invasively by the C13 urea breath test / G.J. Graham, P.D. Klein, D.J. Evans [et al.] // Lancet. - 1987. - I:t. -P. 174-177.
• 38. Hasel S.L. Interaction of lipopolisacharides of Helicobacter pylori with basement membrane protein laminin / S.L. Hasel, D.J. Evans, D.Y. Graham // J. Gen. Mycrobiologya. - 1991. - Vol. 137. - P. 57-61.
• 39. Lau P.P. Phylogenetic diversity and position of the genus Campylobacter / P.P. Lau, B. DeBrunner-Vossbrick, B. Dunn // Syst. Appl. Microbiol. - 1987. -V.9, P. 231-238.
• 40. Lohr J.M. Herpesvirus envelopment // J. Virol. - 1990. - Vol. 64, №5.-P.2168-2174.
• 41. Louka A.S. HLA in celiac disease: unraveling the complex genetics of a complex disorder / A.S. Louka, L.M. Sollid // Tissue Antigens. - 2003. - Vol. 64. - P. m-All.
• 42. Malfertheiner P. Current concepts in the management of Helicobacter pylori infection / P. Malfertheiner, F. Megraud, C. OMorain et al. // The Maastricht III Consensus Report. Gut. - 2007. - № 56. - P. 772-781.
• 43. Miller M.E. Praimary and Secondary Immunodeficiecy Disorders. - London, 1983. -P. 180-194.
• 44. Murthy M.R. Structure of beef liver catalase / M.R. Murthy, T.J. Reid, A. Sicignano, N. Tanaka & M.G. Rossmann // J Mol Biol 152. - 1981.-P. 465^199.
• 45. Peterson W.L. Helicobacter pylori and peptic ulcer disease // N. Engl. J. Med. - 1991. -№ 324. -P. 1043-1048.
• 46. Radcliff F.J. Catalase, a novel antigen for Helicobacter pylori vaccination / F.J. Radcliff, S.L. Hazell, T. Kolesnikow, C. Doidge & A. Lee // Infect Immun 65. - 1997. - R 4668-4674.
• 47. Selgrad M. Helicobacter pylori: Diagnosis and Treatment / M. Selgrad, A. Kandulski, P. Malfertheiner // Curr Opin Gastroenterol 2009. - № 25. - P. 549-556.
• 48. Sidebothman R.L. Hypothesis: Helicobacter pylori, urease, mucus, and gastric ulcer / R.L. Sidebothman, J.H. Baron // Lancet. - 1990. - V.27. - P. 193-195.
• 49. Suerbaum S. The complete genome sequence of thecarcinogenic bacterium Helicobacter hepaticus / S. Suerbaum, C. Josenhans, T. Sterzenbach, B. Drescher, P Brandt, M. Bell, M. Droge, B. Fartmann, H.P Fischer & other authors // Proc Natl Acad SciUSAlOO. - 2003. - P. 7901-7906.
• 50. Tamassy K. Evolution of helicobacter positivity in infants bom from positive mothers / K. Tamassy, L. Simon, M. Francis // Orv. Hetil. -
• 1995.-Vol. 136. №26.-P. 1387-1391.
• 51. Thomson L.M. Phylogenetic study of the genus Campylobacter / L.M. Thomson, R.M. Smibert, J.L. Johnson // Int. J. Syst. Bacteriol. 1988. - V. 38-P. 190-193.
• 52. Tytgat G.H. Treatments regimens to eradicate Helicobacter pylori / G.H. Tytgat // Alimentary Pharmacology and Therapeuties. - 1995. - Vol. 9. - Suppl. 2.-P. 105-110.
• 53. Wray D. Gluten-sensitive recurrent aphthous stomatitis. Digestive Diseases and Sciences // Formerly Am. J. Digest. Dis. - 2011. - Vol. 1. - P. 934-955.
• 54. Yauar B. Clinical importance of celiac disease in patients with recurrent aphthous stomatitis / B. Yauar, E. Abu, S. Auiran // Turk. J. Gastroenterol. - 2012. - Vol. 23, N 1. - P. 14-18.

УДК 616.33